竹子開(kāi)花相關(guān)基因研究解竹子開(kāi)花之謎
竹子開(kāi)花現(xiàn)象一直是一個(gè)未解之謎。大多數(shù)竹種具有3至120年或更長(zhǎng)的開(kāi)花周期,并且在開(kāi)花后表現(xiàn)為竹林成片死亡的現(xiàn)象。研究竹子的開(kāi)花機(jī)制對(duì)竹子的遺傳、發(fā)育和進(jìn)化均有重要意義。中國(guó)科學(xué)院昆明植物所國(guó)家杰出青年科學(xué)基金“竹子開(kāi)花的分子機(jī)制研究”項(xiàng)目的主要研究目標(biāo)是從已知的調(diào)控植物開(kāi)花的基因入手,從竹子中分離這些基因的類(lèi)似基因,通過(guò)轉(zhuǎn)基因途徑了解這些基因的功能,進(jìn)而通過(guò)對(duì)這些基因的表達(dá)調(diào)控研究來(lái)揭示竹子的開(kāi)花成因。
麻竹MADS-box基因的分離和轉(zhuǎn)基因:采用PACE方法從麻竹中分離到了18個(gè)MADS-box基因的cDNA全長(zhǎng),其系統(tǒng)學(xué)分析表明它們明顯地分為5個(gè)支。選擇了5個(gè)基因分別代表這五個(gè)支的MADS-box基因,目前已建立通過(guò)浸花法轉(zhuǎn)化擬南芥的轉(zhuǎn)基因體系,已將5個(gè)目的基因與啟動(dòng)子相連接,并連接進(jìn)入載體pCAMBIA 2301的多克隆位點(diǎn)上,形成了5個(gè)轉(zhuǎn)化質(zhì)粒。目前這5個(gè)質(zhì)粒正在轉(zhuǎn)染農(nóng)桿菌,待已種植的擬南芥達(dá)到初花時(shí)用于轉(zhuǎn)化。
竹子的成花轉(zhuǎn)變基因分離:以水稻、擬南芥CO基因的序列設(shè)計(jì)引物,從玉山竹等5種竹種中擴(kuò)增得到了CO基因的部分序列,約1.5kb,初步分析表明竹子的CO基因與小麥的CO基因更接近。同時(shí)還從玉山竹等2種竹子中分離到一個(gè)2.0kb的全新序列片斷。
麻竹的組織培養(yǎng)誘導(dǎo)開(kāi)花:通過(guò)組織培養(yǎng)麻竹可在試管內(nèi)開(kāi)花,并用開(kāi)花的麻竹小穗的cDNA擴(kuò)增得到了18個(gè)MADS-box基因。進(jìn)一步研究表明不同麻竹的株系間誘導(dǎo)成花的時(shí)間和成花率有很大的差異,用莖尖培養(yǎng)的株系難誘導(dǎo)成花。
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